尿液的成分與結(jié)石的形成密切相關(guān)，當(dāng)尿液的成分發(fā)生變化時(shí)，在尿液中就可能有結(jié)石的形成。尿液成分的變化，主要與體內(nèi)代謝的變化有關(guān)。結(jié)石的形成從化學(xué)動(dòng)力看大致分為成核、生長(zhǎng)、聚焦、固相轉(zhuǎn)化等過(guò)程。在此過(guò)程中有多種促進(jìn)成石物質(zhì)與抑制成石物質(zhì)的參與。

促進(jìn)成石物質(zhì)包括：鈣離子、草酸、磷酸、尿酸、蛋白質(zhì)等因素；抑制成石物質(zhì)包括：枸櫞酸、鎂離子、焦磷酸鹽、大分子物質(zhì)葡糖胺聚糖、RNA分子片段等。Curhan等指出尿液中的尿量、鈣、鎂、草酸、枸櫞酸、鈉、鉀、磷和尿酸等與結(jié)石形成最密切，它們的濃度會(huì)影響結(jié)石的發(fā)生。

尿石癥的患病率及復(fù)發(fā)率高，通過(guò)24h尿成石危險(xiǎn)因素評(píng)估患者的代謝狀況，結(jié)合藥物及飲食指導(dǎo)能有效降低尿石癥的復(fù)發(fā)率。然而對(duì)24h尿液不同的保存及檢測(cè)方法會(huì)對(duì)尿成石危險(xiǎn)因素的分析結(jié)果產(chǎn)生一定影響，從而導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不能真實(shí)地反映人體的代謝水平。成石危險(xiǎn)因素測(cè)定所需24h尿液的長(zhǎng)時(shí)間保存一直都是一個(gè)難題。這是因?yàn)?4h尿液中各成石危險(xiǎn)因素在不同情況下的溶解度不同，不同保存方法都會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響。另外，24h尿標(biāo)本收集周期較長(zhǎng)，尿中成石危險(xiǎn)因素真實(shí)水平易受其它因素影響。

不同研究者對(duì)24h尿標(biāo)本的保存方法的報(bào)道不盡相同。不同的保存方法對(duì)尿液保存的原理雖然不盡相同，但都可用于尿液保存，因而也缺乏統(tǒng)一。與其他的24小時(shí)尿液檢測(cè)項(xiàng)目不同，由于24h尿成石危險(xiǎn)因素分析指標(biāo)較多，特別是枸櫞酸、草酸等易受尿液中其他成分包括細(xì)菌等微生物影響。因此，有的保存方法對(duì)24h尿成石危險(xiǎn)因素分析準(zhǔn)確的結(jié)果及客觀地評(píng)價(jià)人體的代謝水平尤為重要。

目前24h尿成石危險(xiǎn)因素分析標(biāo)本有效保存劑仍存在一定爭(zhēng)議。歐洲泌尿外科協(xié)會(huì)2017版尿結(jié)石指南建議尿結(jié)石的代謝評(píng)估需要連續(xù)兩次的24h尿液的評(píng)估,尿液樣本應(yīng)用5％的麝香草酚異丙醇液防腐，儲(chǔ)存于<8°C的溫度中。尿液pH值的評(píng)估，應(yīng)收集新鮮尿，每天評(píng)估四次。在特殊情況下，鹽酸也可以用作防腐劑，以防止草酸鈣和磷酸鈣的沉淀。鹽酸保存的尿標(biāo)本，不能來(lái)測(cè)pH。如果需要測(cè)定尿液中的尿酸，還需要對(duì)尿液標(biāo)本進(jìn)行尿液的堿化。

一、24h尿液標(biāo)本的收集

由于24h尿成石危險(xiǎn)因素水平易受多種因素影響，每天排泄的水平不穩(wěn)定，因此實(shí)踐中要考慮收集標(biāo)本的次數(shù)以準(zhǔn)確反映人體代謝狀況，同時(shí)也要考慮患者的依從性。邏輯上講，收集24小時(shí)尿液次數(shù)愈多，結(jié)果越能反映人體代謝水平。Grampsas等研究發(fā)現(xiàn)92%的初發(fā)結(jié)石患者愿意收集24小時(shí)尿液進(jìn)行代謝評(píng)估，99%復(fù)發(fā)結(jié)石患者愿意收集24小時(shí)尿液進(jìn)行代謝評(píng)估，Chandhok等研究認(rèn)為99%復(fù)發(fā)性結(jié)石患者愿意行長(zhǎng)期結(jié)石預(yù)防。我國(guó)泌尿系結(jié)石治療指南中也指出，需要連續(xù)收集患者正常飲食下2次24h尿液。歐洲泌尿外科指南也推薦，條件許可的情況下應(yīng)收集兩次24小時(shí)尿定量分析以保證結(jié)果更準(zhǔn)確。但在臨床實(shí)踐中，收集多次24小時(shí)尿會(huì)增加患者費(fèi)用和降低患者對(duì)該項(xiàng)目的信任度，因此常收集單次24小時(shí)尿用于分析成石危險(xiǎn)因素，但其準(zhǔn)確性仍存在爭(zhēng)議。Ronald等認(rèn)為，單獨(dú)收集一份24小時(shí)尿液后先酸化、后堿化就能有效保存尿液中成石危險(xiǎn)因素，這樣可以增加患者依從性。

邏輯上講，收集尿液次數(shù)愈多，結(jié)果越可靠，但為了減輕患者經(jīng)濟(jì)上和時(shí)間上的負(fù)擔(dān)，在我國(guó)指南中指出，需要連續(xù)收集患者正常飲食下2次24小時(shí)尿液，但也有學(xué)者認(rèn)為，兩次24小時(shí)尿定量分析，隔周1次，其中一份于收集前以30ml，6mol/L的濃鹽酸為保存劑，檢查除尿酸外的所以的成石危險(xiǎn)因素，另一份以30ml，0.3mmol/L疊氮化鈉堿化化尿液用以保存和檢查尿液中尿酸，但過(guò)程比較繁瑣。Ronald等認(rèn)為，單獨(dú)收集一份24小時(shí)尿液后先酸化、后堿化就能有效保存尿液中成石危險(xiǎn)因素，這樣可以增加患者依從性。Renato等研究發(fā)現(xiàn)，24小時(shí)尿液收集前和收集后行酸化/堿化等處理都能正確反映尿液中成石危險(xiǎn)因素水平，兩者之間并無(wú)差異。國(guó)外學(xué)者指出收集24小時(shí)尿液可能會(huì)遺漏尿液的收集或過(guò)多的收集尿液。采用檢測(cè)尿液中肌酐，男性一般為20-25mg/kg/d，女性為15-20mg/kg/d，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化尿液后可以只收集一次尿液就能有效檢測(cè)尿液中各成分。劉曉等研究發(fā)現(xiàn)，通過(guò)晨尿或上午隨意尿液的鈣/肌酐，磷/肌酐能較好的反應(yīng)24小時(shí)尿磷和尿鈣值。

二、24h尿液標(biāo)本保存方法

（一）尿液標(biāo)本保存麝香草酚法

麝香草酚是一種能抑菌和殺菌的固體有機(jī)物，能殺滅尿液中細(xì)菌，減少尿液成分分解。因此有學(xué)者提出用麝香草酚保存尿液，并發(fā)現(xiàn)24h后取少量用于檢測(cè)尿肌酐，取部分尿液用濃鹽酸酸化至PH1.5-2.5，取少量加熱至56℃10分鐘，檢測(cè)尿鈣、尿磷、尿鎂、尿草酸及尿枸櫞酸，剩余的尿液加入濃氫氧化鈉堿化至PH為9.0-10.0，取少量尿液加熱至56℃10分鐘后，用于檢測(cè)尿尿酸。結(jié)果證明，麝香草酚能有效保存24h尿中各種成石危險(xiǎn)因素。但操作過(guò)于復(fù)雜。Pak等也發(fā)現(xiàn)用麝香草酚保存后的尿液也能有效反映尿液中的成石危險(xiǎn)因素的值。Albrecht等認(rèn)為用5%的麝草酚溶液就可以有效保存尿液中各成石危險(xiǎn)因素。酸化保存尿液可以降低尿液PH值，抑制尿液中維生素C向草酸轉(zhuǎn)化，但是由于尿液pH降低，會(huì)導(dǎo)致尿酸的溶解度減少。

麝香草酚是固體，無(wú)特殊氣味，毒性較小，便于攜帶，是保存24小時(shí)尿液較好的方法。尿液麝香草酚的保存，常按100ml尿液中加入0.1g麝香草酚，<8°C低溫保存。收集瓶?jī)?nèi)應(yīng)備用5％麝香草酚異丙醇（2L的瓶10毫升）并存放在涼爽的溫度下（<8°C或更低）。尿液pH值應(yīng)該收集新鮮尿每天四次，當(dāng)難以進(jìn)行24h尿收集時(shí)，例如在幼童，可應(yīng)用新鮮尿液樣本替代24h尿液取樣的方法。但對(duì)新鮮尿的研究，可能會(huì)因不同性別，體重和年齡的差異，造成結(jié)果的差異。

（二）尿液標(biāo)本保存酸堿化交替保存法

在09年歐洲泌尿外科指南曾推薦使用酸化、堿化交替的保存方法收集24小時(shí)尿液：①.連續(xù)收集兩次24小時(shí)尿液時(shí)，第1次以30ml,6mol/L的濃鹽酸作為保存劑，檢測(cè)除尿酸外的其他成分；第2次以0.3mmol/L的疊氮化鈉為保存劑，檢測(cè)尿酸。②.收集1次24小時(shí)尿標(biāo)本時(shí)，6點(diǎn)-22點(diǎn)時(shí)段以6mol/L的濃鹽酸為保存劑收集用于除尿酸外的其他各種成分的分析；22點(diǎn)至次日6點(diǎn)的尿液以0.3mmol/L的疊氮化鈉作為保存劑，用于尿酸的分析。Laerum等指出，向收集尿液的容器中預(yù)先加入濃鹽酸后再收集尿液，可以抑制鈣、鎂和草酸鹽沉淀，同時(shí)能防止尿液中草酸前體轉(zhuǎn)變?yōu)椴菟帷?/p>

RenatoRibeiro等研究發(fā)現(xiàn)，無(wú)論是在收集前還是收集后對(duì)尿液行酸堿化處理，都能準(zhǔn)確反映尿液中成石危險(xiǎn)因素水平，兩者之間無(wú)差異。但在尿液中加入酸保存，降低了尿液PH值，可導(dǎo)致尿酸溶解度減低，引起尿酸沉淀。需要收集前或收集后在尿液中加入堿以中和鹽酸。一般按每100ml尿液加入1ml濃鹽酸，但由于濃鹽酸具有腐蝕性，貯存不方便，且會(huì)改變尿液PH值。因此，鹽酸保存并不能完美的保存尿液中所有的成石危險(xiǎn)因素。堿化尿液能增加尿液中到溶解度，國(guó)內(nèi)外推薦使用疊氮化鈉對(duì)尿液進(jìn)行保存，能準(zhǔn)確檢查尿液中尿酸。RenatoRibeiro等研究發(fā)現(xiàn)加入碳酸氫鈉來(lái)堿化尿液也能有效保存尿液中尿酸，因此推薦堿化尿液來(lái)保存尿液中尿酸。

（三）尿液標(biāo)本保存甲苯法

甲苯不溶于尿液，可用于24h尿的保存。其檢測(cè)的值也可以準(zhǔn)確反映成石危險(xiǎn)因素水平。甲苯是一種有機(jī)防腐劑，能在尿液表面形成薄膜，防止尿液細(xì)菌污染，減少尿液中有機(jī)成分的分解。一般與尿液比例按1：100預(yù)先加入到收集容器中。甲苯pH值為中性，不會(huì)對(duì)尿液引起酸堿化，對(duì)機(jī)器和設(shè)備腐蝕作用較小，國(guó)內(nèi)既往一般用甲苯作為24h成石危險(xiǎn)因素分析標(biāo)本的保存劑，然而，甲苯本身具有一定的毒性和強(qiáng)揮發(fā)性，對(duì)人體有一定的副作用，長(zhǎng)期接觸可引起慢性中毒。

（四）尿液標(biāo)本低溫保存法

尿液標(biāo)本低溫保存是指將尿標(biāo)本置于4℃冰箱恒溫保存。Nicar等研究發(fā)現(xiàn)，4℃低溫能有效保存尿液中各成石危險(xiǎn)因素，即使保存5天，尿液中成分也能穩(wěn)定不變，但是這樣檢測(cè)有諸多不便之處，所需設(shè)備要求也較高。Ronald等研究發(fā)現(xiàn)，將暫時(shí)不檢測(cè)的尿液置于低溫，可以減少尿中有機(jī)成分特別是枸櫞酸的分解。但低溫保存會(huì)引起晶體析出，同時(shí)對(duì)設(shè)備要求高，依從性差，不適合24小時(shí)尿標(biāo)本的保存。

（五）尿液標(biāo)本常態(tài)保存法

Yilmaz等研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)24小時(shí)尿液不行酸化處理檢測(cè)尿鈣、尿鎂、尿磷及不行堿化處理檢測(cè)尿尿酸結(jié)果同酸化或堿化處理后的結(jié)果無(wú)差別，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)檢測(cè)前是否通過(guò)加熱來(lái)提高溶解度對(duì)檢查結(jié)果無(wú)影響。但尿液標(biāo)本常態(tài)保存法并不能為大多數(shù)研究者所認(rèn)同。

（六）尿液標(biāo)本甲醛法

甲醛是一種有機(jī)防腐劑，能凝固尿液中蛋白質(zhì)，故可抑制細(xì)菌生長(zhǎng)并固定尿液中有形成分，一般按0.5：100的比例加入尿液中。常用于保存尿液中細(xì)胞的管型，而較少用于保存24小時(shí)尿液成石危險(xiǎn)因素分析標(biāo)本的保存。

總之，尿液成分復(fù)雜，且收集24h尿過(guò)程較長(zhǎng)，每種方法檢測(cè)方法不盡相同，有多種因素可影響尿液中成石危險(xiǎn)因素各成分濃度。因此，只有先擇合適的保存方法和檢測(cè)手段才能得到準(zhǔn)確的結(jié)果。目前各成分特別是陰離子檢測(cè)方法相對(duì)獨(dú)立，手工操作較多，影結(jié)果準(zhǔn)確性的因素較多，期望24小時(shí)尿成石危險(xiǎn)因素分析能全自動(dòng)化以得到更準(zhǔn)確結(jié)果，以利于結(jié)石治療和預(yù)防。