原標(biāo)題：脫敏劑封閉牙本質(zhì)小管的微結(jié)構(gòu)特征及其對(duì)樹脂粘接劑粘接強(qiáng)度的影響

 

　　隨著固定修復(fù)基牙保護(hù)方法的深入研究，在基牙牙本質(zhì)表面涂用脫敏劑成為臨床操作的重要步驟。但是，牙本質(zhì)涂用脫敏劑后的微觀特征及其對(duì)樹脂粘接劑粘接強(qiáng)度的影響尚不明確，因此本實(shí)驗(yàn)采用掃描電鏡觀察牙本質(zhì)分別涂用3種脫敏劑（Gluma系統(tǒng)處理劑、SingleBond2脫敏劑、BisBlockTM脫敏劑）后的微觀特征，評(píng)價(jià)這3種脫敏劑對(duì)樹脂粘接劑粘接強(qiáng)度的影響。

　　Gluma系統(tǒng)處理劑（原Gluma脫敏劑，德國賀利氏古莎齒科有限公司），SingleBond2脫敏劑（3M公司，美國），BisBlockTM脫敏劑、樹脂粘接劑（Bisco公司，美國），牙科高速手機(jī)（西北醫(yī)療器械有限公司），MANI車針(日本馬尼公司)，掃描電鏡JSM-840(JEOL公司，日本)，萬能試驗(yàn)機(jī)（AUTOGRAPHAGS-J型，日本島津公司）。

 

　　1.2離體牙的收集

 

　　在實(shí)驗(yàn)前1個(gè)月，收集因正畸需要拔除的、完整無齲壞的人上頜前磨牙50顆，去凈殘留牙周膜和其余附著物，流水沖洗干凈后保存在1%麝香草酚溶液中[1]。

 

　　選擇12顆人上頜前磨牙，流水沖洗12h去除殘留的麝香草酚[1]，在釉牙骨質(zhì)界最低處下1mm切開，保留牙冠。把牙冠固定在自凝樹脂中，暴露出牙冠大部分。常規(guī)牙體預(yù)備、拋光，暴露出牙本質(zhì)表面。將12個(gè)樣本隨機(jī)分為對(duì)照組、Gluma組、SingleBond2組、BisBlockTM組，除對(duì)照組外，分別按照廠家指導(dǎo)應(yīng)用脫敏劑。將各組樣本在牙冠的側(cè)面磨一導(dǎo)向溝，劈開牙冠。一半樣本用于觀察牙本質(zhì)表面特征，一半樣本用于觀察縱面特征。所有樣本制作時(shí)環(huán)境溫度為（23±1）℃，濕度為（50±10）%。干燥樣本，噴金，掃描電鏡下進(jìn)行觀察。

 

　　1.4粘接強(qiáng)度實(shí)驗(yàn)樣本的制備

 

　　選擇12顆人上頜前磨牙，近遠(yuǎn)中向劈牙成頰舌兩半。把牙片固定在自凝樹脂中，露出牙面，牙體長軸與地面平行。牙體預(yù)備及分組同1.3，24個(gè)樣本分為4組，每組6個(gè)樣本。除對(duì)照組外，其余各組按廠家說明應(yīng)用脫敏劑于牙本質(zhì)表面后，調(diào)拌樹脂粘接劑，用推試管型測(cè)力計(jì)在8N的就位力下把直徑3mm的鎳鉻合金鑄造柱黏固于牙本質(zhì)表面。粘接劑凝固后把試樣放入蒸餾水中，在水浴箱中37℃保存24h。把試樣固定在萬能試驗(yàn)機(jī)剪切夾具中，剪切速度為0.5mm/min[2,3]，電腦自動(dòng)記錄最大剪切應(yīng)力值。

 

　　在鑄件從牙體上離斷后，按照J(rèn)ohnson等[2,4]的分類方法在立體顯微鏡放大15倍下觀察離斷面類型。Ⅰ類：粘接劑主要?dú)埩粼谘荔w上（超過75%）；Ⅱ類：牙體、鑄件上都有粘接劑殘留（25%～75%）；Ⅲ類：粘接劑主要?dú)埩粼阼T件上（超過75%）；Ⅳ類：牙體斷裂而鑄件未與牙體分離。

 

　　1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

 

　　采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)剪切強(qiáng)度實(shí)驗(yàn)數(shù)值進(jìn)行單因素方差分析（ANOVA）。P＜0.05時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

 

　　2結(jié)果

　　對(duì)照組、Gluma組、SingleBond2組、BisBlockTM組牙本質(zhì)表面和縱面的掃描電鏡觀察結(jié)果見圖1。由圖1可見，對(duì)照組的牙本質(zhì)表面呈不光滑高低不平的無序狀結(jié)構(gòu)，可見少量牙本質(zhì)小管開口；縱面見清晰的牙本質(zhì)小管及其樹枝狀分支，小管開口端可見1～2μm厚的復(fù)合層。涂用Gluma脫敏劑后的牙本質(zhì)表面，沉積物幾乎全部堵塞牙本質(zhì)小管開口，較對(duì)照組整齊一致，沉積物密度均勻，與小管壁間有弧線形間隙，還可見沉積物中間有線形裂隙；縱面可見小管內(nèi)有沉積物，但不延續(xù)至牙本質(zhì)表面，牙本質(zhì)小管開口端未見明顯覆蓋層。涂用SingleBond2脫敏劑后的牙本質(zhì)表面，全部被覆顆粒狀沉積物，未見牙本質(zhì)小管開口；放大500倍時(shí)的縱面圖像，明顯可見覆蓋層約30μm，覆蓋層與牙本質(zhì)間可見裂隙。涂用BisBlockTM脫敏劑的牙本質(zhì)表面，牙本質(zhì)小管管周及小部分小管開口內(nèi)可見結(jié)晶樣沉積物，直徑約1～2.5μm，大部分的牙本質(zhì)小管口有沉積物堵塞，小部分直徑大的牙本質(zhì)小管口仍開放；縱面見小管內(nèi)有少量顆粒狀沉積物，小管開口處未見覆蓋層。

 

　　2.2粘接強(qiáng)度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

 

　　對(duì)照組、Gluma組、SingleBond2組、BisBlock組樹脂水門汀的剪切強(qiáng)度分別為（8.58±1.32）MPa、（10.18±2.58）MPa、（10.13±2.38）MPa、（13.04±2.76）MPa。BisBlock組與對(duì)照組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.036）。離斷面類型均為Ⅰ類。

 

　　3討論

 

　　進(jìn)行固定修復(fù)預(yù)備時(shí)，各軸面通常需要切削0.8～2.0mm的牙體組織以保證修復(fù)體的空間，滿足其強(qiáng)度、功能和美觀要求。釉質(zhì)厚度為0.6～2.1mm[5]，牙體預(yù)備后，牙本質(zhì)暴露，牙本質(zhì)小管液流動(dòng)，增加了活髓牙備牙后敏感的風(fēng)險(xiǎn)，甚至患者在牙體預(yù)備后或戴冠后出現(xiàn)難以忍受的基牙酸痛癥狀。

 

　　牙本質(zhì)過敏癥的機(jī)制很多，被人們公認(rèn)的是Br■nnstr■m等提出的流體動(dòng)力學(xué)理論。針對(duì)這個(gè)理論派生出堵塞牙本質(zhì)小管的治療牙本質(zhì)敏感的方法。在理論上，所有堵塞牙本質(zhì)小管的試劑將減少牙本質(zhì)的滲透性，從而降低牙本質(zhì)敏感程度[6]。

 

　　本實(shí)驗(yàn)中，涂用Gluma脫敏劑后能夠堵塞大部分的牙本質(zhì)小管，這和其他學(xué)者研究的結(jié)果相似[7]。同時(shí)觀察可見牙本質(zhì)小管內(nèi)沉積物與小管壁間的弧線形間隙及沉積物間的線形裂隙，可能是由于掃描電鏡樣本制備過程中干燥使牙本質(zhì)小管管腔擴(kuò)大，或是Gluma脫敏劑中的樹脂成分收縮所致?？v面牙本質(zhì)小管內(nèi)的沉積物不延續(xù)至牙本質(zhì)表面，可能由于在劈牙過程中沉積物斷裂而存留于另一半樣本。Gluma脫敏劑由36%2-HEMA（hydroxyethylmethacrylate，甲基丙烯酸羥基乙酯）和5%戊二醛組成[8]。HEMA是一種樹脂，能深入牙本質(zhì)小管，起物理封閉的作用，它可溶于水，有助于戊二醛在小管中的滲透性，使之能在深部起反應(yīng)，戊二醛也是一種生物固定劑，固定表面和小管中牙本質(zhì)液的血漿蛋白，而且具有抗菌效果及抑制細(xì)菌生長或者封閉不完全時(shí)抑制細(xì)菌通過牙體-修復(fù)體界面侵入。本實(shí)驗(yàn)的掃描電鏡結(jié)果證實(shí)了Gluma脫敏劑能夠堵塞絕大部分的牙本質(zhì)小管。

 

　　SingleBond2脫敏劑本質(zhì)上是一種光敏固化的粘接劑，含有丙烯酸酯和10%的5nm的膠質(zhì)樣填料，包括dimethacrylates（二甲基丙烯酸）、BisGMA（BisphenolAglycidyldimethacrylate，雙酚A雙甲基丙烯酸縮水甘油酯）、HEMA。在理論上樹脂突應(yīng)深入小管中，但在本實(shí)驗(yàn)中未見這一現(xiàn)象，而是在牙本質(zhì)與樹脂層間存在裂隙?？v面可見牙本質(zhì)表面覆蓋物厚約30μm，可能與實(shí)驗(yàn)中涂SingleBond2脫敏劑兩次從而形成厚的樹脂層有關(guān)。如果涂用一層脫敏劑，可能改善這種狀況。

 

　　BisBlock是含3%草酸的草酸鹽脫敏劑，能在牙本質(zhì)小管內(nèi)形成草酸鹽晶體。在本實(shí)驗(yàn)中可見結(jié)晶樣物質(zhì)沉積在牙本質(zhì)表面和小管深處，堵塞部分牙本質(zhì)小管開口，結(jié)晶直徑約1～2.5μm。在研究草酸鹽脫敏劑的領(lǐng)域中，Gillam等[9]將4種草酸鹽產(chǎn)品應(yīng)用于經(jīng)酸蝕后的牙本質(zhì)，用掃描電鏡觀察了處理后牙本質(zhì)表面形態(tài)和牙本質(zhì)小管剖面形態(tài)，發(fā)現(xiàn)4種產(chǎn)品牙本質(zhì)表面沉積物的沉積方式并不相同。而在Ling等[6]的實(shí)驗(yàn)中，草酸鐵產(chǎn)生結(jié)晶樣結(jié)構(gòu)堵塞幾乎全部的牙本質(zhì)小管開口。而草酸鉀的結(jié)晶則分散在小管周圍牙本質(zhì)。牙本質(zhì)含水量的改變被認(rèn)為是可能影響結(jié)晶沉積的因素之一。本實(shí)驗(yàn)樣本是拔除的離體牙，牙本質(zhì)液體的丟失可能影響草酸鹽晶體沉積的特征。

 

　　另外，在技術(shù)上，本實(shí)驗(yàn)采用側(cè)面劈開法獲得牙本質(zhì)的自然縱剖面，避免了片切盤磨開法可能破壞或污染縱剖面的缺點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)中清晰的電鏡照片證明了這一點(diǎn)。

 

 

　　樹脂粘接劑一般由基質(zhì)、粘接性單體、稀釋劑、填料、引發(fā)體系和其他添加劑組成。粘接性單體中的分子含有能與牙齒中鈣離子或膠原蛋白反應(yīng)的活性基團(tuán)，以增強(qiáng)材料對(duì)組織的粘接力[10]。Omae等[11]認(rèn)為樹脂粘接劑對(duì)牙本質(zhì)的有效粘接必須是單體能擴(kuò)散進(jìn)入前期處理好的牙本質(zhì)表面。

 

　　本實(shí)驗(yàn)中樹脂粘接劑分別聯(lián)合應(yīng)用3種脫敏劑的剪切強(qiáng)度均增高，尤其BisBlock組與對(duì)照組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這可能與脫敏劑的成分有關(guān)。Gluma和SingleBond2的化學(xué)成分之一為HEMA，含有兩個(gè)功能基團(tuán)：親水基團(tuán)和疏水基團(tuán)。親水基團(tuán)與牙本質(zhì)膠原結(jié)合，提高牙本質(zhì)基質(zhì)潤濕性，讓樹脂單體更易擴(kuò)散和滲透[3]，而疏水基團(tuán)則與粘接劑中的樹脂成分結(jié)合，使它們與牙本質(zhì)有效結(jié)合的同時(shí)，樹脂基成分能與水門汀的樹脂基發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，從而增強(qiáng)了水門汀和牙本質(zhì)的結(jié)合力。BisBlock脫敏劑使樹脂粘接劑的剪切強(qiáng)度提高52%，可能因?yàn)樗呛?%草酸的草酸鹽脫敏劑，在草酸和粘接劑放置前整合了全酸蝕處理，能在牙本質(zhì)小管內(nèi)形成草酸鹽晶體，使樹脂粘接劑滲進(jìn)牙本質(zhì)小管更深，導(dǎo)致剪切強(qiáng)度更大，或是其他成分更有利于樹脂突的滲入，這還需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究。

 

　　以前的學(xué)者研究冠修復(fù)體固位力時(shí)，均在基牙上制備完整的全冠，在全冠合面中央做牽引裝置做拉伸強(qiáng)度試驗(yàn)[2,4,12]。這種試驗(yàn)方法盡管模仿了臨床全冠修復(fù)，但存在一些弊端：基牙尺寸大小不一，牙體預(yù)備后很難計(jì)算牙體合面和軸面粘接面積；難以控制牽引裝置恰好位于全冠合面中央，稍有偏差即影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；所計(jì)算的全冠拉伸強(qiáng)度包含了合面水門汀的粘固力以及軸面的機(jī)械摩擦力和水門汀的粘固力，不能單純代表粘結(jié)產(chǎn)品的粘固力；很難預(yù)備出統(tǒng)一的基牙聚合度等。所以，本實(shí)驗(yàn)僅制作直徑3mm的鑄造鎳鎘合金柱與牙本質(zhì)粘接，各組試樣的粘接面積相同，使測(cè)試結(jié)果更精確的反映各水門汀和脫敏劑組合應(yīng)用后的粘接強(qiáng)度。這和單面膠帶打孔法有相似之處[13]。另外，本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)了用推試管型測(cè)力計(jì)在8N的就位力下被粘體與牙體粘結(jié)，保證各實(shí)驗(yàn)組的就位力一致，避免水門汀薄膜厚度對(duì)粘接強(qiáng)度產(chǎn)生影響。

 

　　在本實(shí)驗(yàn)中，采用的都是因正畸原因拔除的人的離體雙尖牙。離體牙畢竟不同于活體牙，是否能代表在口腔中的性能還有待臨床證實(shí)，但有學(xué)者[14]認(rèn)為離體牙實(shí)驗(yàn)可信。在實(shí)驗(yàn)前，我們控制拔除時(shí)間在1個(gè)月內(nèi)，隨機(jī)選擇樣本，盡量避免牙體結(jié)構(gòu)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。