中文字幕在线一区二区,亚洲一级毛片免费观看,九九热国产,毛片aaa

您的位置:健客網(wǎng) > 傳染病頻道 > 疾病知識 > 預(yù)防措施 > Science子刊:利用LAMP方法快速低成本地檢測寨卡病毒

Science子刊:利用LAMP方法快速低成本地檢測寨卡病毒

2018-07-19 來源:中國病毒學論壇  標簽: 掌上醫(yī)生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護膚
摘要:在一項新的研究中,來自美國、巴西、尼加拉瓜和德國的研究人員開發(fā)出一種新的技術(shù)而使得通過捕捉和測試蚊子來監(jiān)控寨卡病毒(Zika virus, ZIKV)傳播能夠變得更加快速和更加低廉。

 在一項新的研究中,來自美國、巴西、尼加拉瓜和德國的研究人員開發(fā)出一種新的技術(shù)而使得通過捕捉和測試蚊子來監(jiān)控寨卡病毒(Zikavirus,ZIKV)傳播能夠變得更加快速和更加低廉。這種基于環(huán)介導等溫擴增反應(yīng)(loop-mediatedisothermalamplification,LAMP)的檢測方法能夠區(qū)分寨卡病毒亞洲毒株和非洲毒株,而且在理論上可能被用來在現(xiàn)場直接檢測蚊子中可能存在的寨卡病毒。相關(guān)研究結(jié)果發(fā)表在2017年5月3日的ScienceTranslationalMedicine期刊上,論文標題為“RapidandspecificdetectionofAsian-andAfrican-lineageZikaviruses”。

 
美國普渡大學的RichardKuhn(未參與這項研究)說,“你能夠僅是捕捉蚊子,將它們磨碎,或者獲得被感染者的血液樣品和其他類型的樣品,隨后直接檢測寨卡病毒是否存在。你不必進行RNA純化,你也不必執(zhí)行逆轉(zhuǎn)錄步驟,因而真正地簡化這個過程。”
 
美國斯坦福大學的DesireeLaBeaud(也未參與這項研究)補充道,這種方法能夠“在偏遠地區(qū)開展測試,而且也不需要使用昂貴的設(shè)備。它可能用于傳病媒介監(jiān)控和臨床診斷。”
 
盡管在1952年,寨卡病毒首次在非洲在人體中被鑒定出,但是直到近年來一種寨卡病毒亞洲毒株在中美洲和南美洲爆發(fā)流行病,科學家們才確定這種病毒與頭小畸型相關(guān)聯(lián)。這種亞洲毒株與這種非洲毒株存在顯著的序列差異。如今,隨著這種亞洲毒株在廣泛地擴散,而且可能擴散到這種非洲毒株存在的區(qū)域,區(qū)分這兩者可能變得至為重要。
 
存在于蚊子或人體中的寨卡病毒通常是在實驗室中利用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)進行檢測的。正如聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)那樣,LAMP利用序列匹配的引物擴增靶DNA序列。但是不同的是,PCR需要讓反應(yīng)試劑混合液不斷循環(huán)地經(jīng)歷不同的溫度,而LAMP是在恒定的63°C下進行的。這意味著無需購買價格在1.5萬美元到2萬美元的PCR熱循環(huán)儀,而僅需構(gòu)建250美元的加熱塊(heatblock)。
 
寨卡病毒是一種RNA病毒,擴增它的核酸需要先通過逆轉(zhuǎn)錄步驟將其轉(zhuǎn)化為DNA。一種逆轉(zhuǎn)錄酶執(zhí)行這種轉(zhuǎn)化,并被用于RT-PCR和逆轉(zhuǎn)錄-環(huán)介導等溫擴增反應(yīng)(RT-LAMP)之中。但是已存在一些證據(jù)證實用于LAMP測定中的嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus)DNA聚合酶也能夠發(fā)揮著逆轉(zhuǎn)錄酶的作用。確實,Rovnak已發(fā)現(xiàn)這種酶的逆轉(zhuǎn)錄酶活性是“非常令人印象深刻的”,這意味著它能夠同時執(zhí)行DNA轉(zhuǎn)化步驟和擴增步驟。
 
Rovnak說,省掉這個逆轉(zhuǎn)錄步驟和使用簡單的加熱塊,當然會讓這種檢測比RT-PCR測定更加廉價和便于攜帶。但是,如何首先分離寨卡病毒RNA?Rovnak也有一種簡單的現(xiàn)場友好的解決方案。
 
這種方案就是僅需磨碎攜帶寨卡病毒的蚊子,將它們加入到含有LAMP反應(yīng)試劑的試管中,在63°C下孵育,Rovnak團隊能夠強健地擴增寨卡病毒RNA。在15只感染上寨卡病毒的蚊子中,他們能夠準確地全部檢測到,而且在3只未感染上寨卡病毒的蚊子中,他們均未檢測到這種病毒的存在。
 
Rovnak團隊也證實他們能夠直接地從被感染的細胞中區(qū)分寨卡病毒非洲毒株和亞洲毒株。
 
考慮到將這種測定方法用于病人診斷,Rovnak團隊接著直接擴增來自被感染者的血漿、血清和精液樣品中的寨卡病毒亞洲毒株,不過這也會產(chǎn)生一些假陽性和假陰性。Rovnak說,這是由于“尚不確定的抑制物質(zhì)”。
 
Rovnak說,在這種LAMP方法能夠成為一種診斷工具之前,它需要更一步的開發(fā),但是鼓舞人心的是,它是與RT-PCR那樣是穩(wěn)健的、準確的和敏感的,但是試劑成本下降了“大約一半”。
 
看本篇文章的人在健客購買了以下產(chǎn)品 更多>
有健康問題?醫(yī)生在線免費幫您解答!去提問>>
健客微信
健客藥房