血清蛋白電泳（SPE）概述

蛋白質(zhì)在堿性條件下帶不同量的負(fù)電荷，在電場(chǎng)中由陰極向陽(yáng)極泳動(dòng)。醋酸纖維薄膜和瓊脂糖凝膠是目前最常采用的兩大介質(zhì)。由于白蛋白等電點(diǎn)的差異，電泳后由正極到負(fù)極可分為，白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β球蛋白和γ球蛋白五個(gè)區(qū)帶，血清蛋白電泳初步了解血清白蛋白中主要組分的一種技術(shù)方法，通過(guò)血清蛋白電泳來(lái)反映肝細(xì)胞損傷程度和病變范圍。也可用于反映其他疾病如腎臟疾病，風(fēng)濕免疫系統(tǒng)疾病等。

• 檢查部位 全身
• 科室 內(nèi)科
• 相關(guān)疾病 小兒早老癥 肝硬化男性性功能減弱綜合征 肝硬化 小兒腎淀粉樣變性 心原性肝硬化 腎病綜合征 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎 慢性腎炎 風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎 系統(tǒng)性紅斑狼瘡所致精神病 系統(tǒng)性紅斑狼瘡性關(guān)節(jié)炎 抗胰蛋白酶缺乏癥 先天性梅毒性肝硬化 巨球蛋白血癥 藥物性肝硬化 病毒性肝炎 膽汁性肝硬化 小兒原發(fā)性腎病綜合征 原發(fā)性膽汁性肝硬化 營(yíng)養(yǎng)不良性肝硬化
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• 相關(guān)癥狀 腹痛 脊柱和四肢畸形 惡心與嘔吐 腹瀉 咳嗽 咳痰 煙酸缺乏 血紅蛋白尿 膿尿 乳糜尿 血尿 少尿 多尿 尿失禁與遺尿 排尿困難及尿潴留 發(fā)熱 尿頻伴尿急和尿痛 腹脹 急性腎衰竭 蛋白尿
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血清蛋白電泳（SPE）正常值

• 1.瓊脂糖法： 白蛋白48%～64% α1-球蛋白2.5%～5.4% α2-球蛋白8.3%～l4% β-球蛋白8.7%～l5% γ-球蛋白12%～l5% 2.醋酸纖維薄膜法： 白蛋白57%～68% α1-球蛋白0.8%～5.7% α2-球蛋白4.9%～11.2% β-球蛋白7.0%～l3% γ-球蛋白9.8%～18.2%

血清蛋白電泳（SPE）臨床意義

• 1、白蛋白減少見(jiàn)于慢性肝炎、肝硬化、肝癌等。
  2、α1球蛋白(糖蛋白)增高見(jiàn)于原發(fā)性肝癌。在重型肝炎、肝硬化、肝昏迷時(shí)則減少，與白蛋白呈正相關(guān)。肝病時(shí)測(cè)定α1球蛋白對(duì)判斷肝炎的嚴(yán)重程度和預(yù)后有參考價(jià)值。一般情況下，α1球蛋白增加示病情較輕，α1球蛋白減少則提示病情較重，在嚴(yán)重肝功能衰竭時(shí)，其血清含量可顯著降低。
  3、α2球蛋白病毒性肝炎初期無(wú)明顯變化，一周后逐漸增加，亞急性肝炎和急性肝壞死、失代償期肝硬化則減少。
  4、β球蛋白增高見(jiàn)于脂肪肝、高脂血癥、腎病綜合征、糖尿病合并高膽固醇血癥、梗阻性黃疸、惡性腫瘤。在膽汁淤積性肝病時(shí)其含量升高，與α2球蛋白升高相平行。降低于見(jiàn)于急、慢性肝炎，肝硬化，尤以失代償期肝硬化和壞死肝硬化下降最為顯著。
  5、 γ球蛋白增高見(jiàn)于慢性肝炎、肝硬化、肝膽疾患。典型肝硬化尚可見(jiàn)β和γ帶相融合，形成β-γ橋。肝病患者γ球蛋白的變化可反映病情的嚴(yán)重程度。隨病情好轉(zhuǎn)，其含量可逐漸降至正常，如一直在高水平持續(xù)不降，提示病情嚴(yán)重，預(yù)后不良，并有向慢性肝炎及肝硬化發(fā)展的趨勢(shì)。此外，感染、血吸蟲(chóng)病、多發(fā)性骨髓瘤、結(jié)締組織病等也可升高。降低見(jiàn)于丙種球蛋白缺乏癥、部分化療患者等。
  另外，多發(fā)性骨髓瘤在β球蛋白區(qū)帶與γ球蛋白區(qū)帶之間常出現(xiàn)M球蛋白帶;雙白蛋白血癥可見(jiàn)雙條白蛋白區(qū)帶。

血清蛋白電泳（SPE）檢查方法

• 1、將緩沖液加入電泳槽內(nèi)，調(diào)節(jié)兩側(cè)槽內(nèi)的緩沖液，使其處于同一平面。
  2、醋酸纖維素薄膜的準(zhǔn)備：取醋酸纖維素薄膜(2cm×8cm)在毛面的一端(負(fù)極側(cè))1.5cm處用鉛筆輕劃一橫線，做點(diǎn)樣標(biāo)記。編號(hào)，并標(biāo)明正、負(fù)極后，將薄膜置于巴比妥-巴比妥鈉緩沖液中浸泡，待充分浸透后(一般為20min)取出，夾于潔凈濾紙中間吸去多余的緩沖液。
  3、將醋酸纖維素薄膜毛面向上貼于電泳槽支架上拉直。用微量吸管吸取無(wú)溶血血清3～5μl于橫線處沿橫線加樣，樣品應(yīng)與薄膜的邊緣保持一定的距離，以免電泳圖譜中的蛋白區(qū)帶變形，待血清滲入薄膜后，反轉(zhuǎn)薄膜，使光面朝上，平直地貼于電泳槽支架上，用雙層濾紙或四層紗布將薄膜的兩端與緩沖液連通，稍待片刻。
  4、接通電源，注意醋酸纖維素薄膜上的正、負(fù)極，切勿接錯(cuò)。電壓90～150v，電流0.4～0.6mA/cm(不同的電泳儀所需電壓，電流可能不同，應(yīng)靈活掌握)，夏季通電45min，冬季通電時(shí)間稍長(zhǎng)，約為60min，電泳區(qū)帶展開(kāi)約25～35mm即可。
  5、染色：通電完畢，取下薄膜直接浸于麗春紅S染液或氨基黑10B染色液中，染色5～10min(以白蛋白區(qū)帶染透為止)，然后在漂洗液中漂去剩余染料，直至背景無(wú)色為止。
  6、定量：
  ①比色法：將漂洗的薄膜吸干，剪下各染色的蛋白區(qū)帶入相應(yīng)的試管中，在白蛋白管中加0.4mol/L氫氧化鈉6ml(計(jì)算時(shí)吸光度乘以2)，其余各管加3ml，振搖數(shù)次，置37℃水箱20min使其色澤浸出。氨基黑10B染色用分光光度計(jì)在620nm處讀取各管吸光度，然后計(jì)算出各管的含量(同時(shí)做空白管對(duì)照)。
  麗春紅S染色時(shí)浸出液用0.1mol/L氫氧化鈉，加入量同上法。10min后，白蛋白管內(nèi)加400ml/L醋酸0.6ml(計(jì)算吸光度時(shí)乘以2)，其余各管加0.3ml，以中和部分氫氧化鈉，使色澤加深，必要時(shí)離心，取上清液用分光光度計(jì)在520nm處讀取各管的吸光度(同時(shí)作空白對(duì)照)，然后計(jì)算各自的含量。
  ②光密度計(jì)掃描法：A.透明：吸去薄膜上的漂洗液(為防止透明液被稀釋影響透明結(jié)果)，將薄膜浸入透明液中2～3min，然后取出，以滾動(dòng)的方式平貼于潔凈無(wú)劃痕的載物玻璃片上(切勿產(chǎn)生氣泡)，將此玻片豎立片刻，除去多余透明液后，置于恒溫90℃至100℃的烘箱內(nèi)，烘烤10～15min，取出冷卻至室溫，用此法透明的各蛋白區(qū)帶鮮明，薄膜平整，可供直接掃描和永久保存(用氫萘或液體石蠟透明，應(yīng)將漂洗過(guò)的薄膜烘干后進(jìn)行透明，此法透明的薄膜不能存久，且易發(fā)生皺折)。B.掃描定量：將已透明的薄膜放入全自動(dòng)光密度計(jì)或其他光密度計(jì)暗箱內(nèi)，進(jìn)行掃描分析。 

血清蛋白電泳（SPE）注意事項(xiàng)

• 1、空腹12小時(shí)，抽取靜脈血化驗(yàn)，標(biāo)本一定要新鮮血液。
  2、化驗(yàn)前要告知醫(yī)生近期所服用的藥物以及近期的生理改變。
  3、下列情況可出現(xiàn)生理性升高：
  （1）α1-球蛋白升高可見(jiàn)于妊娠6個(gè)月后。
  （2）α2-球蛋白升高可見(jiàn)于出生1～6個(gè)月的嬰兒，妊娠4～6個(gè)月中度升高，7～9個(gè)月顯著升高。
  （3）β-球蛋白升高見(jiàn)于嬰兒出生后、妊娠4～6個(gè)月。
  （4）γ-球蛋白升高見(jiàn)于預(yù)防接種免疫疫苗后。